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Método rápido de extração de DNA utilizando CTAB em tecidos musculares de suínos1

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  1. Financiamento: CAPES, CNPq, FAPEMIG;
  2. Estudante de Graduação – UFV;
  3. Estudante de Pós-Graduação – UFV;
  4. Professor Orientador do Departamento de Zootecnia – UFV;
  5. Pesquisador da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia

 

Resumo: Estudos básicos sobre técnicas de extração de DNA são de extrema importância para o sucesso de trabalhos científicos no campo da biologia molecular. Diante desta afirmação, o presente trabalho tem como objetivo avaliar a eficiência do método de extração de DNA utilizando-se o detergente catiônico CTAB (brometo de cetil-trimetilamônio). Esta técnica aplicada a variados materiais biológicos, foi testada em quatro amostras de tecido muscular de suínos. Depois de extraído o DNA, duas análises foram realizadas: Quantificação em espectofotômetro e subseqüente amplificação por PCR (Reação da Polimerase em Cadeia). Os resultados puderam ser observados mediante visualização do material amplificado em gel de poliacrilamida 8%. A diluição que apresentou melhor qualidade e concentração de DNA para as amplificações, foi a de 1:10, e as bandas específicas para os quatro fragmentos do gene da miostatina testados puderam ser observados no gel e confirmam o bom resultado obtido por essa técnica. Pôde-se concluir que o protocolo é viável, visto que o material extraído poderá ser submetido a amplificações de marcadores moleculares.

Palavras-chave: Miostatina, PCR, Marcadores Moleculares


A faster CTAB techique for DNA extraction from swine muscle

abstract: Basics studies about DNA extraction techniques are very important for the studies in mollecular biology area. The present work relates the efficiency of CTAB protocol for DNA extraction (Catonic hexadecyl trimethyl ammonium bromide). Here is applicated to many biological materials, and was tested on four samples of swine muscular tissue. After extraction, two analysis were realized: Quantification in spectrophotometer and PCR amplification. The results were visualized in 8% polyacrilamide gels. The dilution that showed better quality and concentration for the PCR was 1:10. The especific bands observed for the four fragments of myostatin gene tested, were seen in the gels and confirm the good results taken whit this method. In conclusion, this protocol is feasable, because the material could be used in molecular markers by PCR amplifications.

Keywords: Myostatin, PCR, Molecular Markers


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