Resumo: O estudo foi conduzido com objetivo de avaliar a porcentagem de ovos olhados, a partir de quatro diferentes proporções de espermatozóides por ovócito (15x106, 30x106, 45x106 e 60x106), para o sêmen criopreservado de machos-XX de truta arco-íris. O sêmen de cinco machos-XX foi coletado através de massagem abdominal, e homogeneamente misturado para compor um “pool”. O “pool” foi diluído 1:3 em um meio de congelamento composto por 10% glicose 5,4%; 10% gema de ovo e 10% DMSO, envasado em palhetas de 0,5 ml e congelado em botijão de vapor de nitrogênio líquido. Cem ovos de cada fêmea (n=3 fêmeas) foram distribuídos em copos plásticos e o sêmen descongelado a 70ºC/3s foi imediatamente misturado aos ovos. A ativação dos espermatozóides foi realizada com uma solução de NaHCO3 1%. Depois de 20 minutos da ativação, os ovos foram lavados com água corrente e as parcelas aleatoriamente distribuídas em incubadoras tipo bandeja. A taxa de ovos olhados foi determinada após 16 dias de incubação. Quando se utilizou uma proporção de 15x106 espermatozóides por ovo, a taxa de ovos olhados foi de 30%, sendo significativamente menor (P<0,05) quando comparada às outras três proporções utilizadas (30x106, 45x106, 60x106) que apresentaram taxas de ovos olhados de 39%, 45% e 43%, respectivamente. Proporções acima de 30x106 espermatozóides por ovo são suficientes para promover taxas de ovos olhados acima de 39% para o sêmen de machos-XX, quando criopreservado em glicosegema- DMSO.
Palavras-chave: criopreservação, fertilização, peixe.
Abstract: The aim of this study was evaluate the eyed-egg percentage obtained of cryopreserved semen of rainbow trout XX-males. Four sperm: egg ratios (15x106, 30x106, 45x106 and 60x106) were tested. The semen of five XX-males was collected under abdominal massage and mixed to compose one pool. Pool of semen was diluted 1:3 in the freezing medium containing glucose 5.4%; 10% egg yolk; 10% DMSO, aspired into 0.5-ml straws, frozen in nitrogen vapor and stored in liquid nitrogen. One hundred egg of each females (n=3) were distributed in plastic cups and semen thawing at 70°Cwater bath for 3s was immediately mixed to eggs. Sperm activation was realized with NaHCO3 1% solution. After 20 minutes of the activation, the eggs were washed with water and distributed in incubators type tray. Egg-eyed rate was determined after 16 days of incubation. In the sperm: egg ratio 15x106 the egg-eyed rate is significantly less (P<0.05) than other ratios evaluated (30x106, 45x106, 60x106) that showed egg-eyed rate of 39%, 45% e 43%, respectively. Ratios upper of 30x106 sperm to egg are enough to promote egg-eyed rate higher than 39% for the XX-males semen cryopreserved in glucose-egg yolk-DMSO.
Keywords: cryopreservation, fertilization, fish.
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