Resumo: Este trabalho teve como objetivo estudar a estrutura molecular do gene do Hormônio de Crescimento em búfalas, em busca de variações de nucleotídeos, relacionando estas variações com a seleção para produção de leite. Utilizou-se a técnica da Reação em Cadeia da Polimerase. Para isso foram designados pares de oligonucleotídeos que flanqueavam parte do éxon 5 do gene GH de búfalos, presente na região 3p do cromossomo 3. Amostras de DNA de 84 búfalas mestiças (Murah/Jafarabadi) foram genotipadas para a busca de variações genéticas. Uma vez amplificado, o fragmento de 223 pares de bases foi submetido à digestão com a enzima Alu I. Dos 84 produtos da PCR, referentes à amplificação deste fragmento, 76 originaram bandas específicas de tamanho correspondente ao esperado pela seqüência do gene descrita por TIWARI e GARG (1998); 93% destes animais possuíam o genótipo Leucina / Valina, 4% possuíam o genótipo Valina / Valina e 3% o genótipo Leucina / Leucina. Oito animais não originaram bandas específicas de tamanho correspondente ao esperado pela seqüência do gene descrita por TIWARI e GARG (1998), apresentando quatro bandas, sendo a primeira de peso molecular de aproximadamente 300 pb, a segunda de 223 pb, a terceira de 123 pb e quarta de aproximadamente 82 pb. Estes resultados indicam a ocorrência de um possível sítio reconhecido pela enzima Alu I em posições diferentes da citada na literatura. Nenhum outro trabalho foi encontrado, descrevendo o polimorfismo no GH em bubalinos.
Palavras-chave: marcador molecular, PCR, DNA, cromossomo
Abstract: This work had as objective the study of the Growth Hormone gene (GH) molecular structure in female water buffaloes, in search of nucleotides variation, related with the selection for milk production. The technique Polymerase Chain Reaction (PCR) was used. For that, oligonucleotides pairs were designated that flanked part of the Exon 5 of water buffaloes GH gene, present in the area 3p of the chromosome 3. DNA samples of 84 female water buffaloes (Murrah/Jafarabadi) were genotyped to the genetic variation search. Once amplified, the fragment of 223 base pairs was submitted to the digestion with the enzyme Alu I. From 84 PCR products, regarding the amplification of this fragment, 76 originated specific bands with size corresponding to the expected for the gene sequence described by TIWARI and GARG (1998); 93% of these animals possessed the genotype Leucine / Valine, 4% possessed the genotype Valine / Valine and 3% the genotype Leucine / Leucine. Eight animals did not originate specific bands of size corresponding to the expected gene sequence described by TIWARI and GARG (1998), presenting four bands, being the first of molecular weight of approximately 300 bp, second of 223 bp, the third of 123 bp and fourth of approximately 82 bp. These results indicate the occurrence of a possible sitio recognized by the enzyme Alu I in different positions from the mentioned in the literature. No other work was found, describing the GH polymorphism in water buffaloes.
Keywords: molecular marker, PCR, DNA, chromosome
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